轉(zhuǎn)染試劑是一種新結(jié)構(gòu)類型的DNA轉(zhuǎn)染試劑。該轉(zhuǎn)染試劑為陽離子聚合物和脂質(zhì)體的雜合體，具有轉(zhuǎn)染效率高、重復(fù)性好、毒性低和穩(wěn)定性*的特點(diǎn)，目前該轉(zhuǎn)染試劑為我公司產(chǎn)品。轉(zhuǎn)染試劑用于哺乳動物細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，如腫瘤細(xì)胞系(常見的細(xì)胞有HEK293,CHO,COS-1,COS-7,Hela,NIH3T3等)和原代培養(yǎng)的細(xì)胞以及昆蟲細(xì)胞sf9,sf21等。轉(zhuǎn)染試劑，1.0ml，可用于24孔板轉(zhuǎn)染333次或者6孔板166次轉(zhuǎn)染操作。
轉(zhuǎn)染試劑由納米高分子聚合物組成，分子內(nèi)含有許多氨基，在生理PH下會發(fā)生質(zhì)子化，這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負(fù)電荷，使DNA分子由伸展結(jié)構(gòu)壓縮為體積相對較小的DNA粒子，并包裹在其中，使DNA免受核酸酶的降解。轉(zhuǎn)染復(fù)合物主要是通過細(xì)胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞，形成內(nèi)含體，DNA從內(nèi)含體釋放，進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，再進(jìn)一步進(jìn)入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。通過納米技術(shù)生產(chǎn)出的轉(zhuǎn)染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結(jié)合保護(hù)DNA能力強(qiáng)、毒性低的*性能。
轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用：
將DNA導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞。
同病毒協(xié)同轉(zhuǎn)染難轉(zhuǎn)哺乳動物細(xì)胞，可顯著增強(qiáng)病毒的轉(zhuǎn)染效率。
轉(zhuǎn)染試劑的使用及效果：
將2μg無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA和4μL本產(chǎn)品分別稀釋到50μL溶液A中，將上述兩溶液混勻，加入到在1mL培養(yǎng)基中生長了18-24小時、覆蓋率達(dá)到50-80%的培養(yǎng)細(xì)胞中，輕搖以混勻，然后在37℃/5%CO2孵箱中培養(yǎng)，24-72小時后根據(jù)實驗需要進(jìn)行瞬時表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。
轉(zhuǎn)染試劑主要用于哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染以及穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建，可以將轉(zhuǎn)染實驗操作縮短到一分鐘即可完成。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1、本產(chǎn)品和質(zhì)粒混合后無需室溫靜置孵育，直接轉(zhuǎn)染。
2、毒性低，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高。
3、適合于多種常用的細(xì)胞系。
4、可直接加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，而且無需在轉(zhuǎn)染后補(bǔ)加血清和更換超快轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基。
5、如果實驗?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系，可以在細(xì)胞傳代后可直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染實驗，不需轉(zhuǎn)染前細(xì)胞培養(yǎng)時間。
6、無需在轉(zhuǎn)然后4-6小時補(bǔ)加血清或更換培養(yǎng)基。
